%0 Journal Article %T 转内切葡聚糖酶基因罗伊乳酸杆菌的构建及其肉鸡饲喂效果验证 %A 王磊 %A 曹平华 %A 蔡蓓 %A 高印 %A 高康 %A 杨雨鑫 %A 杨明明 %A 袁超 %A 陈玉林 %J 牲畜兽医学报 %P 774-783 %D 2015 %X ?本研究旨在构建可胞外分泌内切葡聚糖酶,且具有降解β-葡聚糖能力的转内切葡聚糖酶基因罗伊乳酸杆菌,并对其进行肉鸡饲喂效果验证,为后续转基因乳酸杆菌在动物生产中的应用奠定基础。采用pcr和酶切连接方法构建plem4157(cel)载体,转化lactobacillus.reuterixc1感受态细胞,进行聚丙烯胺凝胶电泳表达谱分析和内切葡聚糖酶活性测定,同时测定其肉鸡饲喂效果。结果表明,克隆的内切葡聚糖酶基因大小为1500bp,经测序比对,与已报道基因序列相似性为99%,氨基酸序列相似性为100%;native-page和sds-page分析结果表明,内切葡聚糖酶基因celw成熟肽在罗伊乳酸杆菌的蛋白分子量均为52ku左右,与理论计算值相符;l.reuteriplem4157(cel)培养上清和胞内上清内切葡聚糖酶活性分别为(0.96±0.08)和(0.37±0.09)u?ml-1;l.reuteriplem4157(cel)对肉仔鸡生长性能无显著影响,但可显著降低21日龄肉仔鸡十二指肠、空肠ph,促进21日龄肉仔鸡肾、法氏囊、胸腺和胰腺的生长发育,增加42日龄肉仔鸡的胸腺和胰腺指数,提高肉仔鸡21日龄血清白球比、钙、磷含量和42日龄血清葡萄糖含量。l.reuteriplem4157(cel)成功分泌表达了内切葡聚糖酶,具有降解羧甲基纤维素的能力和一定的肉鸡饲喂效果。 %K 转基因 %K 内切葡聚糖酶基因 %K 罗伊乳酸杆菌 %K 饲喂效果 %K 肉鸡 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13572.shtml