%0 Journal Article %T 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心elisa方法的初步建立 %A 刘月 %A 张宇飞 %A 孙晓林 %A 刘淑英 %J 牲畜兽医学报 %P 800-807 %D 2015 %X ?为制备抗绵羊肺腺瘤病毒(jsrv)囊膜蛋白(env)胞质尾区(ct)的单克隆抗体,利用生物信息学分析jsrv囊膜蛋白氨基酸序列,根据分析结果合成多肽,将此多肽分别连接钥孔血蓝蛋白(ct-klh)和牛血清白蛋白(ct-bsa),用ct-klh作为抗原免疫balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接elisa方法筛选分泌抗ct蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌抗ct蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8e5,亚类为igg2a/κ。间接elisa检测培养上清效价为6.4×103,腹水效价为1×105。westernblot及免疫组化结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体能识别jsrv抗原,与其发生特异性反应。试验结果证明,单抗8e5是绵羊肺腺瘤的重要诊断试剂。应用8e5细胞株分泌的单克隆抗体建立jsrv-env的双抗体夹心elisa检测方法,该elisa检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为快速检测诊断绵羊肺腺瘤和研究囊膜蛋白功能奠定了基础。 %K 绵羊肺腺瘤病毒 %K 囊膜蛋白 %K b细胞表位 %K 单克隆抗体 %K elisa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13575.shtml