%0 Journal Article %T 猪膜联蛋白a2多克隆抗体的制备、亲和纯化与鉴定 %A 陈江涛 %A 王光祥 %A 吉艳红 %A 尚佑军 %A 刘艳红 %A 刘湘涛 %J 牲畜兽医学报 %P 1502-1509 %D 2010 %X ?本研究旨在制备并亲和纯化兔抗猪膜联蛋白a2多克隆抗体。通过pcr从质粒pa2egfp中将编码猪膜联蛋白a2与增强型绿色荧光蛋白融合基因(annexa2-egfp)亚克隆到pet30a(+),构建了原核表达质粒p30a/ae,转化大肠杆菌rosetta(de3),经iptg诱导以包涵体形式表达了猪annxa2-egfp融合蛋白,用niresinhp树脂对表达的目的蛋白进行亲和纯化。用纯化的annxa2-egfp融合蛋白免疫兔,制备兔抗猪膜联蛋白a2多克隆抗体。将以前纯化的猪可溶性gst-annxa2融合蛋白偶联nhs活化琼脂糖凝胶ff,亲和纯化多克隆抗体。用gst-annxa2亲和纯化的多抗效价达到1∶12800,westernblot和免疫组化结果证实具有高特异性。制备的高效价和高特异性兔抗猪膜联蛋白a2多克隆抗体,为进一步研究膜联蛋白a2在病毒感染中的作用奠定了基础。 %K 猪膜联蛋白a2 %K 多克隆抗体 %K 亲和纯化 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11277.shtml