%0 Journal Article %T am80和tsa对鸡stra8基因启动子活性的调控作用 %A 刘志永 %A 左其生 %A 肖天荣 %A 韦光辉 %A 陈庭峰 %A 朱睿 %A 张振韬 %A 王怡临 %A 蒋舒颖 %A 张亚妮 %A 李碧春 %J 牲畜兽医学报 %P 896-902 %D 2015 %X ?旨在确定鸡stra8基因启动子的主要调控区域,预测调控元件结合位点,探索用他米巴洛丁(am80)或曲古抑菌素(tsa)诱导对stra8启动子活性的调控作用。将鸡stra8基因5′侧翼系列缺失片段插入到pgl3-basic载体构建重组质粒,并转染df-1和gc-1,通过检测荧光素酶活性和预测启动子区域调控元件的结合位点,选取合适的启动子片段并构建其重组质粒stra8-egfp;将am80和tsa分别按一定的浓度梯度诱导转染细胞,进行荧光素酶活性检测以筛选最佳诱导浓度;用最适剂量的am80和tsa分别单独或联合诱导转染重组质粒stra8-egfp的p19,并检测各诱导组的绿色荧光表达程度。结果表明,鸡stra8基因启动子-1055~+54bp片段的活性较强,且含有rarα、rxrα和rarβ的结合位点;分别单独或联合使用am80和tsa对转染的细胞进行诱导,结果显示,am80和tsa协同作用的荧光素酶活性最高;重组质粒stra8-egfp转染细胞后,用am80(10-5mol?l-1)和tsa(10-6mol?l-1)联合诱导可见绿色荧光强度最强。本研究成功分析了鸡stra8基因启动子的活性和调控元件的结合位点,确定am80和tsa共同诱导可显著提高stra8基因启动子调控活性。 %K stra8基因 %K 启动子活性 %K 调控元件 %K am80 %K tsa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13595.shtml