%0 Journal Article %T 犬瘟热病毒囊膜糖蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达及鉴定 %A 虞一聪 %A 冯娜 %A 闫飞虎 %A 盖微微 %A 王铁成 %A 王化磊 %A 郑学星 %A 赵永坤 %A 黄耕 %A 杨松涛 %A 高玉伟 %A 夏咸柱 %J 牲畜兽医学报 %P 981-988 %D 2015 %X ?为表达具有天然构象的犬瘟热病毒(cdv)囊膜糖蛋白融合蛋白(f)和血凝素蛋白(h),本研究扩增小熊猫源cdv驯化致弱株lp的f、h基因,克隆至pfastbactm1载体中,测序验证后转化至dh10bactm感受态细胞,同源重组获得穿梭质粒rbacmid-f、rbacmid-h,将其分别转染sf9细胞获得重组杆状病毒rpfb-f、rpfb-h,并将表达的重组融合蛋白(rf)和血凝素蛋白(rh)进行ifa和westernblot鉴定。以犬抗cdv高免血清对重组杆状病毒感染细胞进行ifa鉴定,在感染细胞的细胞膜上可见特异性荧光反应;以鼠抗f、h蛋白的主要抗原表位区多克隆抗体对重组杆状病毒感染细胞进行westernblot检测,可见相对分子质量为63和68ku左右的条带,分别为重组融合蛋白(rf)和血凝素蛋白(rh),大小与预期相符。两种囊膜糖蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中均成功表达,且具有良好的反应原性。本研究为cdv病毒样颗粒疫苗的开发等工作奠定了基础。 %K 犬瘟热病毒 %K 融合蛋白 %K 血凝素蛋白 %K 杆状病毒-昆虫细胞系统 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13605.shtml