%0 Journal Article
%T 氯喹对过氧化氢诱导平滑肌细胞内质网应激途径凋亡的影响
%A 李松岩
%A 郭敏
%A 王烟
%A 于洋
%A 刘师兵
%A 徐冶
%J 解放军医学杂志
%P 960-965
%D 2015
%X [摘要]　目的　探讨氯喹对过氧化氢诱导平滑肌细胞(SMC)内质网应激途径凋亡的影响。方法　体外培养主动脉SMC细胞，分别加入100、400和800μmol/LH2O2培养12h后，MTT法检测SMC细胞生存率。将细胞分为对照组、H2O2组、氯喹组、H2O2+氯喹组，培养12h后采用MTT法检测氯喹阻断自噬后SMC细胞的生存率，倒置相差显微镜观察H2O2对SMC细胞形态变化的影响，间接免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达，Westernblotting检测Beclin-1、LC3、GRP78、CHOP、Caspase-3及CleavedCaspase-3蛋白的表达。结果　MTT检测结果显示，100、400、800μmol/LH2O2作用12h后，SMC细胞存活率明显降低，IC50为447.4μmol/L；氯喹阻断自噬后，SMC细胞存活率明显降低(P<0.05)。倒置相差显微镜观察结果显示，H2O2+氯喹组SMC收缩变圆，细胞密度明显下降。激光共聚焦显微镜观察显示，H2O2与氯喹联合作后，SMC细胞质中LC3和p62蛋白表达均明显增加，且有明显共定位现象。Westernblotting检测结果表明，H2O2与氯喹联合作用后，SMC中内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP和自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达明显增加(P<0.05，P<0.01)，凋亡执行分子Caspase-3的裂解形式蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论　氯喹对过氧化氢诱导SMC通过内质网应激途径的凋亡具有促进作用。
%K 自噬
%K 肌细胞
%K 平滑肌
%K 细胞凋亡
%K 氯喹
%K 过氧化氢
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=81455