%0 Journal Article
%T C3G基因对H9C2心肌细胞凋亡和增殖的影响
%A 杨东艳
%A 李刚
%A 张蕾
%A 张志升
%A 扶艳波
%A 胡苏蕾
%J 解放军医学杂志
%P 603-609
%D 2015
%X 目的　探讨C3G基因对H9C2心肌细胞凋亡、增殖的影响及其机制。方法　构建RNA干扰慢病毒，购买pCXN2-Flag空质粒和pCXN2-Flag-hC3G过表达人C3GmRNA质粒。分别用空白试剂、阴性慢病毒、C3GsiRNA慢病毒、C3GsiRNA慢病毒+空质粒、C3GsiRNA慢病毒+hC3G质粒随机感染和转染H9C2心肌细胞，实验被随机分为5个组，即空白对照组、阴性对照组、沉默C3G组、沉默C3G+空质粒组和沉默C3G+过表达人C3G组。转染质粒72h后，采用RTPCR法检测目的基因C3GmRNA的表达，流式细胞术检测H9C2心肌细胞的凋亡情况，MTT比色法测定细胞增殖率，Westernblotting检测细胞C3G、p-ERK1/2、Bax及Flag的蛋白表达水平。结果　阴性对照组和沉默C3G组经嘌呤霉素筛选，85%以上细胞被绿色荧光蛋白标记，提示细胞被慢病毒感染。与空白对照组和阴性对照组比较，沉默C3G组和沉默C3G+空质粒组的细胞中Bax蛋白表达水平和细胞凋亡率均明显增加(P<0.01，P<0.05)，且这两组细胞C3GmRNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表达水平和细胞增殖率均明显降低(P<0.01，P<0.05)；与沉默C3G组和沉默C3G+空质粒组比较，沉默C3G+过表达人C3G组的细胞中Bax蛋白表达水平和细胞凋亡率明显降低(P<0.01，P<0.05)，且细胞中C3GmRNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表达水平和细胞增殖率则明显增加(P<0.01，P<0.05)。结论　沉默C3G基因能有效抑制细胞的增殖，促进H9C2心肌细胞凋亡；过表达C3G基因能逆转沉默C3G基因对H9C2心肌细胞的影响，表现为细胞凋亡减少，增殖明显，其机制可能与C3G基因对p-ERK1/2蛋白和促凋亡分子Bax的调控有关。
%K C3G
%K 心肌细胞
%K 凋亡
%K 增殖
%K P-ERK1/2蛋白
%K bcl-2相关X蛋白质
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=81381