%0 Journal Article %T MARCH1真核表达载体的构建及鉴定 %A 李菲 %A 陆江阳 %A 刘茜 %A 李新技 %J 解放军医学杂志 %P 297-299 %D 2012 %X [摘要] 目的 构建MARCH1真核表达载体并进行鉴定和纯化,为研究MARCH1在小鼠树突细胞(DCs)中的生物学作用奠定基础。方法 从小鼠尾部提取cDNA作为模板,采用特异的引物,通过聚合酶链反应(PCR)扩增MARCH1cDNA片段,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,连接于载体pMB-HA质粒上,构建重组载体,经双酶切和DNA测序分析检测重组载体构建结果,转化大肠埃希菌DH5α感受态菌、筛选阳性克隆、抽提质粒并进行纯化。结果 PCR获得与预期大小一致(约3900bp)的cDNA片段,成功构建重组载体pMB-HA-MARCH1,双酶切及测序鉴定证实MARCH1cDNA片段正确插入该真核表达载体中。结论 成功构建含有MARCH1的真核表达载体,为进一步研究提供了实验基础。 %K MARCH1 %K 质粒 %K 真核表达载体 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=80736