%0 Journal Article %T 慢性乙肝患者石蜡包埋肝组织中HBVcccDNA定量检测方法的建立 %A 韩佳琪 %A 钟彦伟 %A 任晓强 %A 邹正升 %A 刘树红 %A 刘学恩 %A 赵景民 %A 徐东平 %J 解放军医学杂志 %P 459-462 %D 2011 %X 目的?建立慢性乙肝患者微量石蜡包埋肝组织共价闭合环状DNA(HBVcccDNA)定量检测方法。方法??以37例慢性?乙肝患者甲醛固定石蜡包埋肝组织为研究对象,提取肝组织HBVDNA,经不降解质粒的ATP依赖的DNA酶(PSAD)消化后,利用?滚环扩增加跨缺口实时荧光PCR扩增技术检测肝组织中HBVcccDNA含量,以β-actin为内参照。通过已知浓度的模板DNA进行?梯度稀释鉴定该方法的灵敏度,并对该方法进行批内和批间重复性检测。应用该方法分析37例慢性乙肝患者肝组织HBVcccDNA?与血清总HBVDNA、肝组织总HBVDNA的关系,以及肝组织HBVcccDNA和HBVDNA与血清HBeAg表达之间的关系。结果????成功建立了微量石蜡包埋肝组织HBVcccDNA的定量检测方法,该方法具有较好的特异性、灵敏度和稳定性。HBeAg阳性者肝组织?中cccDNA含量明显高于HBeAg阴性者,HBVcccDNA水平与血清总HBVDNA水平(R???2??=0.48,P=0.042)及肝组织总HBVDNA?水平(R???2??=0.63,P=0.001)呈正相关。结论??该方法可特异灵敏地定量检测微量石蜡包埋组织切片中的HBVcccDNA。 %K 肝炎病毒 %K 乙型 %K DNA %K 环状 %K 核酸扩增技术 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=46553