%0 Journal Article %T 急性乙肝患者HBV特异性CD8T细胞受体基因的克隆分析 %A 丁宁 %A 叶海燕 %A 刘妍 %A 范振平 %A 黄丽利 %A 赵平 %A 靳雪源 %A 邹正升 %A 徐东平 %J 解放军医学杂志 %P 490-493 %D 2011 %X 目的?探讨急性乙肝患者HBV特异性CD8T细胞受体(TCR)参与免疫应答的分子机制。方法??分离HLA-A2阳性?急性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs),用荧光标记的CD3、CD8抗体和五聚体染色,流式细胞仪检测HBsAg183-191和HB-?sAg335-343特异性CD8T细胞频率。取6例患者PBMCs,用HBsAg335-343表位多肽诱导培养3~4周,用磁珠分选出CD8T细胞?后再用流式细胞术分选HBV特异性CD8T细胞,经IL-2/CD3抗体/CD28抗体扩增后提取细胞mRNA,用cDNA5′末端快速扩增技?术获取TCR分子α链和β链全长可变区基因片段并进行克隆和测序,每个样本的克隆测序数≥50个。确定TCRα、β链基因家族并?比较CDR3区序列特点。结果??6例患者样本600多个TCRα、β链克隆基因序列分析结果表明,HBV特异性CD8T细胞均呈现?TCR分子α、β链基因家族优势表达特点,每例患者样本以2~4种α链和1~4种β链家族为主,其中α2、α14、α15、β3、β13和23链家族?同时出现在1例以上患者,有1例患者所有克隆分析的β链基因均为β13家族。同一患者同一家族α、β链CDR3区序列趋于一致,而?不同患者同一家族α、β链CDR3区序列相差较大。结论??经HBV抗原表位多肽诱导增殖的特异性CD8T细胞具有明显的TCRα、β?链取用优势特点,这种TCR链的优势表达特点可能是影响抗HBV感染特异性细胞免疫力的重要分子基础。 %K 肝炎 %K 乙型 %K 急性 %K 表位 %K T淋巴细胞 %K 受体 %K 抗原 %K T细胞 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=46552