%0 Journal Article %T 酵母双杂交技术筛选与乙型脑炎病毒NS5相互作用的蛋白 %A 周希珍 %A 赵慧 %A 李晓峰 %A 邓永强 %A 秦成峰 %A 秦鄂德 %A 高岚 %J 解放军医学杂志 %P 382-384 %D 2011 %X [摘要]目的?应用酵母双杂交技术筛选与乙型脑炎病毒NS5蛋白相互作用的宿主蛋白。方法??构建表达乙型脑炎病毒NS5?蛋白的诱饵质粒pSos-NS5,经自激活和毒性实验后对人脐静脉内皮细胞cDNA文库进行筛选,挑取37℃条件下在缺失亮氨酸和尿嘧?啶培养基上生长的克隆,利用一对一酵母回复性杂交实验进行验证,然后测定阳性克隆插入片段序列,通过Blast分析确定可能与?NS5相互作用的蛋白。结果??构建的诱饵载体pSos-NS5对酵母宿主无毒性,且无自激活活性。经过筛选得到3个阳性克隆(10,11,?4′6号克隆),经测序和Blast分析,初步确定4′6号克隆编码的TC21蛋白可能与NS5发生相互作用。结论??经酵母双杂交技术筛选?到一种可能与NS5蛋白具有相互作用的人类蛋白,为深入探讨乙型脑炎病毒NS5蛋白的生物学功能奠定了基础。 %K 酵母双杂交 %K 乙型脑炎病毒 %K NS5蛋白 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=43804