%0 Journal Article
%T 大鼠脑胶质瘤荧光素酶动物模型建模细胞株C6-Luc的构建
%A 黄伟
%A 吕明
%A 李保卫
%A 王玉丽
%A 邵荣光
%A 高钟镐
%J 解放军医学杂志
%P 35-38
%D 2011
%X ［摘要］目的？构建稳定表达萤火虫荧光素酶的大鼠脑胶质瘤细胞株C6-Luc。方法？？通过浓度梯度法测定C6大鼠脑胶质瘤？细胞的潮霉素最佳筛选浓度。使用FuGENE？？？？HD转染试剂将表达荧光素酶的真核质粒pGL4.50转染至C6细胞，应用潮霉素筛选？多克隆细胞株，进一步采用有限稀释法筛选单克隆细胞株。采用报告基因分析对单克隆细胞株进行阳性鉴定，并考察荧光素酶在阳？性克隆中表达的稳定性。对阳性克隆进行体外生物发光检测，确定最小细胞检测量，并采用线性回归分析生物发光强度与细胞数量？的相关性。将阳性克隆细胞种植于Wistar大鼠脑部，应用生物发光成像检测系统对肿瘤细胞在脑部的生长进行体内监测。结果？？？？C6细胞的潮霉素最佳筛选浓度为250μg/ml。质粒pGL4.50成功转染至C6细胞，通过潮霉素抗性筛选得到12个单克隆细胞株。通？过荧光素酶报告基因分析，成功鉴定了荧光素酶表达活性最高的阳性克隆，命名为C6-Luc，连续培养3代后C6-Luc细胞表达荧光素？酶的活性无显著差异。体外生物发光检测结果显示C6-Luc细胞的最小检测数量为78个，细胞发光强度（y）与细胞数量（x）呈良好的？线性关系，回归方程为y=81.348x-2143.1，相关系数r=0.997。体内生物发光检测结果显示，Wistar大鼠脑部种植C6-Luc细胞后，？随肿瘤体积增大，大鼠脑部的发光强度逐渐增强。结论？？成功构建了稳定表达荧光素酶的大鼠脑胶质瘤细胞株C6-Luc。
%K 荧光素酶类
%K 萤火虫
%K 生物发光成像
%K 神经胶质瘤
%K 模型
%K 动物
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=40364