%0 Journal Article
%T 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及CM-Dil标记的脑内示踪
%A 陈朝
%A 黎奔
%A 郭建文
%J 解放军医学杂志
%P 946-953
%D 2010
%X 目的？建立大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）的分离和培养方法，并探讨采用氯甲基苯甲酰胺（CM-Dil）对BMSCs进行？体外标记和体内示踪的可行性。方法？？全骨髓贴壁法分离获取BMSCs，收集第3代细胞，流式细胞术检测CD34、CD44和CD29的表？达率。加入CM-Dil对BMSCs进行体外标记，荧光倒置显微镜下观察24h、21d和30d时的标记情况，通过描绘生长曲线明确CM-Dil？对体外培养BMSCs生长特性的影响。制作局灶性脑缺血大鼠模型，将CM-Dil标记的BMSCs立体定向移植至大脑纹状体区，于移植？后7、14、21d取脑组织制备冰冻切片，荧光显微镜下观察标记细胞在脑内的存活及分布情况。结果？？BMSCs贴壁培养至第3代后呈成纤维细胞样，形态均一、排列有序，CD34、CD44和CD29表达率分别为1.71%、80.32%和84.89%。体外CM-Dil标记24h的BMSCs？发出红色荧光，标记率为100%;21d后，经传代培养的BMSCs荧光强度与24h时点相近，但30d后荧光有所淬灭。标记后细胞的生长、增殖特性未受影响，形态无改变。脑组织冰冻切片发现移植的BMSCs在7、14、21d时主要位于针道附近，并向周围扩散，数量逐渐减少，呈椭圆形或不规则形。结论？？通过贴壁培养可以从大鼠骨髓中分离培养出较纯的BMSCs。CM-Dil染色简单、有效、无细胞毒性，体外标记BMSCs的最长时限为21d，可作为BMSCs脑内定向移植的体内示踪方法。
%K 骨髓
%K 间质干细胞移植
%K 脑缺血
%K 氯甲基苯甲酰胺
%K 荧光染料
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=31879