%0 Journal Article
%T 鼠肝炎冠状病毒非结构蛋白1内保守序列LLRKxGxKG的功能研究
%A 林磊
%A 吴晓燕
%A 常国辉
%A 祝庆余
%J 解放军医学杂志
%P 508-512
%D 2010
%X 目的？研究鼠肝炎冠状病毒（MHV）非结构蛋白1（NSP1）内的保守氨基酸序列LLRKxGxKG的功能。方法？？扩增并构建MHVNSP1正常基因及LLRKxGxKG序列缺失突变的NSP1基因，分别将其插入真核表达载体pcDNA3.1中，获得真核表达质粒。用所构建的真核表达质粒转染L929细胞，经新城疫病毒（NDV）刺激诱导后，采用ELISA法检测IFN-β的表达水平，观察NSP1正常或突变蛋白对IFN-β表达的影响。通过与含CAT和Luc报告基因的重组质粒进行共转染，观察NSP1正常或突变蛋白对IFN-β启动子活性和干扰素刺激应答元件（ISRE）活性的影响。通过与三种报告基因（pRLuc-CMV、pGL3-basic、pGL3-control）共转染，观察NSP1正常或突变蛋白对共转染基因表达的影响。结果？？MHVNSP1对真核细胞产生干扰素有一定的影响，并可显著抑制IFN-β启动子或ISRE应答元件的活性，且该抑制作用不受LLRKxGxKG序列缺失的影响。同时，MHVNSP1还可强烈抑制多种共转染报告基因的表达。该抑制作用在LLRKxGxKG序列缺失后显著降低。结论？？MHVNSP1对Ⅰ型干扰素信号通路有特异的抑制作用。？LLRKxGxKG序列是MHVNSP1的一个重要功能域，在抑制共转染基因表达过程中发挥着重要作用。
%K 冠状病毒属
%K 肝炎病毒
%K 鼠
%K 病毒非结构蛋白质类
%K 保守序列
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=22642