%0 Journal Article %T 大鼠肝细胞球形体低温保存条件的初步探索 %A 刘鸿凌 %A 游绍莉 %A 李晨 %A 刘婉姝 %A 万志红 %A 臧红 %A 朱冰 %A 荣义辉 %A 柳芳芳 %A Scott %A L.Nyberg %A 辛绍杰 %J 解放军医学杂志 %P 936-940 %D 2014 %X 目的 探索有效的肝细胞球形体低温保存方法,促进生物人工肝及其他研究的应用。方法 采用两步法分离大鼠肝细胞,经无血清培养基(SFM)摇摆培养48h形成肝细胞球形体。将球形体继续培养(对照组),或置于4℃SFM,SFM+1mmol/L去铁胺(Def),SFM+1μmol/L环孢霉素A(CsA),SFM+1mmol/LDef+1μmol/LCsA保存液中24h或48h,继续培养4d或5d后观察低温保存后肝细胞球形体的存活率、超微结构变化,以及白蛋白和尿素合成情况。结果 Def和CsA能很好地保护球形体肝细胞,在4℃SFM+Def+CsA保存液中保存24h,肝细胞球形体功能、结构等变化及尿素合成水平与对照组比较差异无统计学意义,而单独放在SFM中进行低温保存后,细胞活性明显下降。在4℃保存48h后,球形体肝细胞超微结构发生明显变化,死亡细胞增多,但SFM+Def+CsA组和SFM+Def组细胞结构优于SFM组和SFM+CsA组,细胞存活率及尿素合成水平明显高于后两组(P<0.05),但合成白蛋白量均处于较低水平,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 低温状态下肝细胞球形体可保持良好的存活率和功能24h,低温保存能为细胞治疗提供良好的细胞材料。 %K 肝细胞 %K 低温保存 %K 球形体 %K 细胞 %K 肝 %K 人工 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=81240