%0 Journal Article
%T IRE1α重组腺病毒载体对ATDC5软骨干细胞增殖及凋亡的影响
%A 李祥柱
%A 张鹏
%A 韩晓凤
%A 李美玲
%A 夏飞
%A 郭风劲
%J 解放军医学杂志
%P 639-643
%D 2013
%X 目的　构建重组人IRE1α腺病毒，观察其对软骨干细胞ATDC5增殖与凋亡的影响。方法　应用pAdEasyTM腺病毒载体系统构建包含全长IRE1α基因和RNase+Kinase核心结构域的重组穿梭质粒pAdTrack-IRE1α、pAdTrack-R+K，通过电转法分别与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组，获得重组腺病毒pAd-IRE1α、pAd-R+K。随后在HEK-293细胞中包装并扩增重组腺病毒颗粒Ad-IRE1α、Ad-R+K。用直接PCR法鉴定重组腺病毒，后者体外感染软骨干细胞ATDC5，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)感染效率，并应用流式细胞仪分别检测在内质网应激(ERS)和非ERS状态时重组腺病毒对ATDC5细胞增殖和凋亡的影响。结果　酶切鉴定和PCR证实成功构建了重组腺病毒质粒pAd-IRE1α、pAd-R+K。流式细胞仪检测结果显示，在ERS状态时，重组腺病毒质粒Ad-IRE1α、Ad-R+K感染后ATDC5细胞G1期比例明显降低，S期细胞比例明显升高(P<0.05)，细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。结论　含IRE1α基因的重组腺病毒感染可促进ATDC5细胞的增殖和凋亡。
%K IRE1α
%K 腺病毒科
%K ATDC5细胞
%K 细胞增殖
%K 细胞凋亡
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=80943