%0 Journal Article %T 新城疫病毒Italien株辅助质粒的构建及功能鉴定 %A 任臻 %A 尉丁 %A 南刚 %A 胡福泉 %A 陈志南 %A 边惠洁 %J 解放军医学杂志 %P 702-706 %D 2012 %X [摘要] 目的 构建基于T7启动子的含新城疫病毒(NDV)Italien株核衣壳蛋白(NP)、磷酸化蛋白(P)和蛋白(L)基因的表达质粒,作为构建重组NDV所需的辅助质粒。方法 将NDV的NP、P和L基因酶切后置于T7启动子和核糖体进入位点序列的下游,分别构建NP、P和L基因的表达质粒,转染BSR-T7/5细胞,采用间接免疫荧光法(IFA)检测病毒蛋白的表达,利用微型基因组(MG-L)质粒检测辅助质粒组装核糖核酸蛋白质复合物(RNP)的功能。结果 测序证实辅助质粒构建正确。IFA检测可观察到NP和P基因的表达。与MG-L单转染对照组和空白对照组相比,辅助质粒和MG-L共转染后,报告基因萤火虫荧光素酶得到高效表达(P<0.001)。结论 成功构建了基于T7启动子的NDV辅助质粒,为进一步构建重组溶瘤NDVItalien株奠定了基础。 %K 新城疫病毒 %K 遗传学技术 %K 溶瘤病毒 %K 重组 %K 辅助质粒 %U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=80780