%0 Journal Article
%T Ezrin多克隆抗体制作及应用
%A 张宏玲
%A 万骏
%A 严飞
%A 张新胜
%A 曹威
%A 陶伟
%A 黄来强
%J 生物技术通报
%P 129-133
%D 2013
%X 构建Ezrin原核重组表达载体pET-28a（+）-ezrin，将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）中，诱导获得Ezrin蛋白，将经镍柱亲和层析纯化后的蛋白分别免疫新西兰大耳兔和昆明小鼠（KM），获得抗血清，采用ELISA和Westernblotting，免疫荧光测定其效价和特异性。ELISA对抗血清进行效价测定表明抗血清可与抗原发生特异性免疫反应；通过Westernblotting对抗血清进行鉴定表明抗血清可以识别几种细胞株内的特异性条带，其相对分子量为82kD，与预测分子量相符；免疫荧光试验表明抗血清可以识别细胞内的Ezrin蛋白，且定位情况与文献报道相符。最后通过proteinG对抗血清进行了纯化。结果表明用该方法制备的Ezrin多克隆抗体有较高的特异性和灵敏度。
%K 原核表达纯化
%K Ezrin
%K 蛋白
%K 动物免疫
%K 抗血清
%K 抗体鉴定
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract9701.shtml