%0 Journal Article
%T 噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮模拟表位肽
%A 徐富勇
%A 徐玲
%A 刘仁荣
%A 裘雪梅
%A 朱立鑫
%J 生物技术通报
%P 144-150
%D 2013
%X 拟用pⅧ噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）模拟表位肽，并验证其反应原性。通过将含有ZEN模拟表位序列以及肠激酶酶切位点的寡聚核苷酸与经过EcoRI和BamHI双酶切的pC89S4噬菌粒连接，构建表达载体pC89-CZEN。pC89-CZEN转化感受态XL1-Blue得到工程菌pC89-ek-zen，然后用KM13超感染、IPTG诱导表达，纯化后得到展示有玉米赤霉烯酮模拟表位的噬菌体颗粒。对KM13超感染时菌体浓度OD600、IPTG诱导时菌体浓度OD600、IPTG加入量以及诱导表达温度和时间进行优化，以探索最佳表达条件；通过ELISA测定反应原性，对比肠激酶酶切前后模拟表位肽与ZEN抗体的结合效果。结果显示，成功构建了表达载体pC89-CZEN，最优表达条件为KM13超感染时菌体浓度OD600为0.4、IPTG诱导时菌体浓度OD600为0.6以及IPTG加入量为终浓度1.0mmol/L、诱导表达温度为24℃、时间8h，酶切后结合效果明显高于酶切前。
%K 噬菌体展示系统
%K 玉米赤霉烯酮
%K 模拟表位
%K 肠激酶
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract9704.shtml