%0 Journal Article %T IQ基序突变对AtIQM1的钙调素结合活性的影响 %A 黄章科 %A 张艺能 %A 莫忠蓁 %A 周玉萍 %A 黄小玲 %A 田长恩 %J 生物技术通报 %P 128-132 %D 2014 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.12.021 %X 旨在确定IQ基序中关键氨基酸残基突变对IQM1的CaM结合活性的影响,利用基因体外定点突变技术将LQ缺失或将L突变成S,并通过酵母双杂交分析突变蛋白iqm1的CaM结合活性。结果显示,用重组质粒pGADT7-IQM1CDS、pGADT7-IQM1Del113-114、pGADT7-IQM1L113S或pGBKT7-CaM5分别转化酵母AH109,未出现自激活现象;用pGADT7-IQM1CDS和pGBKT7-CaM5共转化酵母能在选择性培养基(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal)上形成蓝色菌落;而用pGADT7-IQM1Del113-114和pGBKT7-CaM5或pGADT7-IQM1L113S和pGBKT7-CaM5共转化酵母则不能在选择性培养基(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp)上形成菌落。结果表明,IQ基序中LQ或者L是IQM1与CaM5结合的关键氨基酸残基。 %K AtIQM1 %K IQ %K 基序突变 %K 酵母双杂交 %K CaM %K 结合 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10489.shtml