%0 Journal Article %T 红笛鲷p38βMAPK基因的克隆及原核表达 %A 夏洪丽 %A 蔡佳 %A 鲁义善 %A 简纪常 %A 吴灶和 %J 生物技术通报 %P 177-183 %D 2014 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.12.030 %X 鱼类p38MAPK基因在宿主免疫调控及抵御病原侵染的过程中具有重要作用。利用RACE技术克隆了红笛鲷p38βMAPK基因(Ls-p38β,GenBank登录号为KJ502277)。序列分析结果显示,Ls-p38βcDNA全长1628bp,开放阅读框1086bp,可编码361个氨基酸,预测其编码蛋白的分子量为41.6kD,理论等电点为5.74。该基因推导的氨基酸序列含有p38MAPK家族保守的双磷酸化激活环(TGY),与尼罗罗非鱼的p38β有97%的相似性。将此基因定向插入原核表达载体构建重组表达质粒pET32-p38β后导入BL21(DE3)菌株,利用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE与Westernblot分析显示约在60kD出现特异蛋白条带,与预期分子量大小相符,说明Ls-p38β融合蛋白表达成功。 %K 红笛鲷 %K p38β %K 丝裂原活化蛋白激酶 %K 原核表达 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10497.shtml