%0 Journal Article %T 鸡胚胎干细胞多能性相关基因cNanog和cPouV干扰载体的构建及筛选 %A 彭特 %A 王丙云 %A 李东升 %A 陈志胜 %A 陈胜锋 %A 计慧琴 %A 陈金顶 %J 生物技术通报 %P 117-121 %D 2014 %X 旨在构建靶向鸡胚胎干细胞多能性相关基因cNanog和cPouV的siRNA表达载体,并在体外检测其对cNanog和cPouV表达的抑制作用。分别选择cNanog和cPouV中3个区域合成寡聚核苷酸构建siRNA表达载体,同时构建cNanog和cPouV全基因表达载体来检测基因表达下调的效果。经Westernblotting检测显示,所构建的siRNA表达载体可在293T细胞内表达siRNA或shRNA,诱发RNA干扰效应,从而抑制目的基因cNanog和cPouV的表达。不同位点的寡核苷酸序列抑制效率不同,其中pS3-cNanog和pS3-cPouV重组质粒的干扰效果和抑制效率最好。研究结果为后续得到稳定干扰cNanog和cPouV基因的重组载体和进一步研究cNanog和cPouV基因功能奠定了基础。 %K 鸡 %K 胚胎干细胞 %K cNanog %K cPouV %K 干扰载体 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10245.shtml