%0 Journal Article
%T 毛白杨PtoeIF5A4的原核表达、纯化及鉴定
%A 张杰伟
%A 管阳
%A 朱丹
%A 陈亚娟
%A 丁莉萍
%A 王宏芝
%A 魏建华
%J 生物技术通报
%P 83-87
%D 2014
%X 为获取大量高纯度的毛白杨PtoeIF5A4蛋白以便研究其特性和生物学功能，以pGEM-TEasy-PtoeIF5A4质粒为模板，PCR扩增毛白杨PtoeIF5A4基因的cDNA编码区，测序正确后，经酶切将其插入到原核表达载体pET28a上，然后将表达载体转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)，经不同浓度IPTG诱导培养后发现，0.1mmol/LIPTG，28℃诱导4h时目的蛋白最多，且该重组蛋白主要以可溶性的形式存在。采用亲和纯化从可溶性蛋白中纯化到大小为18kD的蛋白条带。Westernblotting分析发现亲和纯化所得蛋白可以与His单克隆抗体发生免疫交叉反应，表明纯化所得蛋白是PtoeIF5A4重组蛋白。
%K 毛白杨
%K PtoeIF5A4
%K 原核表达
%K 蛋白纯化
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10239.shtml