%0 Journal Article %T Tgf2转座子多克隆位点的克隆与表达 %A 陶然 %A 常玉梅 %A 梁利群 %A 唐然 %A 窦新杰 %A 王楠 %A 李明云 %J 生物技术通报 %P 124-129 %D 2014 %X 以金鱼pTgf2-EF1α-EGFP转座子为基础,构建含有多克隆位点(Multiplecloningsites,MCS)序列以及外源目的基因肌醇-3-磷酸合成酶(Myo-inositol-3-phosphatesynthase,MIPS)的重组表达载体并注射到斑马鱼1-2期受精卵,检测重组表达载体pTgf2-EF1α-MCS-EGFP和pTgf2-EF1α-MCS-MIPS-EGFP在斑马鱼中绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达情况以及外源基因MIPS在斑马鱼体内的整合情况。荧光观察结果显示,两个重组载体均不影响EGFP的表达,只是表达强度存在一定差异,表明对Tgf2转座子的改造是有效的。转基因斑马鱼PCR检测结果显示,靶基因MIPS的编码区能够完整地整合到斑马鱼基因组中,整合效率达31.4%。重组表达载体的成功构建显示金鱼Tgf2转座子可以介导外源基因在斑马鱼中的表达,为以后Tgf2转座子在鱼类基因功能研究方面奠定了基础。 %K 金鱼 %K Tgf2转座子 %K MCS序列 %K 转基因斑马鱼 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10151.shtml