%0 Journal Article
%T 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测
%A 陆睿
%A 宋绍征
%A 祁正强
%A 葛欣
%A 邵宾
%A 成勇
%J 生物技术通报
%P 216-221
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.10.033
%X 人组织纤溶酶原激活剂（ht-PA）是临床血栓疾病治疗的主要生物药品,应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有报道,但重组人纤溶酶原激活剂（rhPA）在转基因动物中表达尚未见报道。设计了以人t-PA的F、E、K1区位点缺失体为编码序列,以山羊β-酪蛋白/CMV杂合启动/增强子,构建了乳腺特异性表达载体PCL25/rhPA,通过受精卵原核显微注射法制备转基因兔。用PCR检测及其产物测序筛选转基因兔,ELISA试剂盒及纤维蛋白平板溶圈法检测转基因兔的表达产物。实验获得原代转基因兔5只（2♂,3♀）,其中2只乳腺中表达人重组纤溶酶原激活剂,rhPA浓度最高可达400μg/mL,表达产物比活性是现有阿替普酶的150-200倍。实验结果表明,重组人纤溶酶原激活剂（rhPA）可以在山羊β-酪蛋白/CMV杂合启动/增强子调控下获得乳腺特异性表达,表达重组蛋白具有较高的溶栓活性。
%K 转基因兔
%K 人组织纤溶酶原激活剂（ht-PA）
%K 乳腺特异性表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10857.shtml