%0 Journal Article
%T 薯蓣褪绿坏死花叶病毒CP基因的原核表达及抗血清的制备
%A 张鹏远
%A 任龙辉
%A 王建光
%A 陈壮壮
%A 钟宇
%A 陈穗云
%J 生物技术通报
%P 206-212
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.030
%X 薯蓣褪绿坏死花叶病毒（yamchloroticnecroticmosaicvirus,YCNMV）是马铃薯Y病毒科柘橙病毒属暂定成员。采用RT-PCR方法,以Sprimer/M4简并引物对扩增获得的YCNMV分离物3'端基因组序列为参考序列,根据该序列设计CP基因特异引物获得YCNMVCP基因并插入pET-30a表达载体中,在BL21（DE3）菌株中诱导表达。获得的融合蛋白经Ni+-NTA柱纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果表明,连接在表达载体中的CP基因序列及表达的蛋白氨基酸序列与预期的CP基因核苷酸和氨基酸序列同源性均为99.65%。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,获得的融合蛋白大小约为44kD,与预期蛋白大小相符。制备的抗血清经Westernblotting和ID-ELISA检测表明,获得的多克隆抗体效价较高,能可靠、灵敏、特异地与YCNMV病毒颗粒结合,可应用到该病毒的检测中。
%K 薯蓣褪绿坏死花叶病毒
%K 外壳蛋白
%K 原核表达
%K 抗血清
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10786.shtml