%0 Journal Article
%T 大黄鱼Wap65-2基因成熟肽区酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
%A 裘天休
%A 李长红
%A 陈炯
%J 生物技术通报
%P 108-113
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.016
%X 用大黄鱼Wap65-2基因成熟肽区构建酵母双杂交诱饵质粒,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。从大黄鱼（Larimichthyscrocea）肝组织cDNA中扩增Wap65-2基因成熟肽片段（LcWap65-2m）,将其克隆至pGBKT7载体中,获得诱饵载体pGBKT7-LcWap65-2m,经PCR、酶切和测序验证无误后,转化至酵母菌株Y187中,在营养缺陷培养基中观察重组蛋白的毒性作用和自激活活性,同时利用Westernblot分析重组蛋白的表达。成功扩增LcWap65-2m,并克隆至pGBKT7载体中;Westernblot检测结果表明,pGBKT7-LcWap65-2m在酵母细胞中表达诱饵蛋白LcWap65-2m;表型筛选结果显示,LcWap65-2m无毒性作用和自激活活性。成功构建了LcWap65-2m酵母双杂交诱饵载体,为进一步利用酵母双杂交技术筛选与Wap65-2相互作用的蛋白奠定基础。
%K Wap65-2
%K 酵母双杂交
%K 表达
%K 自激活
%K 毒性
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10771.shtml