%0 Journal Article
%T 甜高粱琥珀酸半醛脱氢酶SbSSADH基因克隆及原核表达
%A 王龙海
%A 杨泽伟
%A 朱莉
%A 黄大昉
%A 郎志宏
%J 生物技术通报
%P 83-90
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.013
%X γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid，GABA)代谢旁路是TCA循环的一个代谢支路，广泛存在于动植物和微生物中，植物GABA代谢旁路与植物生物和非生物胁迫响应相关。琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)是GABA旁路的一个关键酶，对GABA途径在生物体内发挥功能起着至关重要的作用。通过检索MaizeGDB和Gramene数据库获得甜高粱SbSSADH基因信息，利用同源克隆的方法获得了甜高粱SbSSADH基因。序列分析结果表明，SbSSADH基因与玉米、甘蔗在核酸序列的相似度为94.77%，但前端约200bp的信号肽部分差异较大。通过以pET-28a为表达载体构建SbSSADH原核表达系统，Rosetta菌株为表达菌，表达出约50kD的SSADH蛋白，将纯化的蛋白进行酶活分析，纯化蛋白具有琥珀酸半醛脱氢酶活性，并且受酶抑制剂ATP和AMP的抑制。
%K 甜高粱
%K SSADH
%K 蛋白表达
%K 酶活测定
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10733.shtml