%0 Journal Article
%T 黔产宽叶缬草ISSR反应体系的建立与优化
%A 钱志瑶
%A 周道堂
%A 黄秀平
%A 周镁
%A 陈祖云
%A 覃容贵
%J 生物技术通报
%P 69-75
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.011
%X 旨在建立稳定、可靠的宽叶缬草ISSR反应体系。以10个水平单因素试验为基础，应用L16(45)正交设计对反应体系中4个主要因子在4个水平上进行组合优化，并采用直观法、极差法和方差法对试验结果进行分析；利用优化的反应体系，筛选引物以及最佳退火温度；同时，以9份不同产地宽叶缬草样品对反应体系进行稳定性检测。结果显示，宽叶缬草25μLISSR最佳反应体系为：2.5μL10×TaqBuffer，2.0mmol/LMg2+，0.28mmol/LdNTPs，0.3μmol/L引物，1.75UTaqDNA聚合酶，60ngDNA模板，ddH2O补齐；影响大小依次是：Mg2+>引物>dNTPs>TaqDNA聚合酶；确定了各引物的最佳退火温度以及筛选出扩增条带清晰稳定的17条ISSR引物；稳定性实验表明，该体系稳定可靠。优化出宽叶缬草ISSR最佳反应体系并筛选出理想的引物。
%K 宽叶缬草
%K ISSR
%K 单因素试验
%K 正交设计
%K 体系优化
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10731.shtml