%0 Journal Article
%T 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的克隆表达及纯化
%A 闫锦锦
%A 闫东明
%A 邹雪
%A 刘丹
%A 彭超
%A 苏亚南
%J 生物技术通报
%P 220-225
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.034
%X 为获得高纯度具有生物活性的尿素酶B亚单位(UreB)蛋白，利用PCR方法扩增出ureB目的基因，将其插入到pET28a载体中，构建表达质粒pET28a-ureB。将鉴定正确的质粒转入大肠杆菌中培养，通过IPTG诱导表达获得UreB蛋白。采用QSepharoseHighPerformance阴离子交换层析纯化，G-25凝胶过滤层析脱盐，并通过SDS-PAGE和免疫双扩散法对UreB蛋白进行鉴定。结果表明，该蛋白相对分子质量约为64kD，与预期结果相符，脱盐后获得的UreB蛋白纯度为98.5%；免疫双扩散法证明该蛋白具有良好的生物活性和反应特异性。最终确定的纯化工艺，达到了一步纯化即得到高纯度、具有生物活性蛋白的目的，该纯化工艺简单、有效。
%K 幽门螺杆菌
%K 尿素酶B亚单位
%K UreB蛋白
%K 蛋白纯化
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10753.shtml