%0 Journal Article %T 溶藻弧菌转运蛋白TolB的免疫原性与免疫保护性 %A 庞欢瑛 %A 周泽军 %A 张燕飞 %A 李静 %A 邱明生 %A 丁燏 %A 简纪常 %A 吴灶和 %J 生物技术通报 %P 143-149 %D 2015 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.021 %X 旨在研究溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)HY9901转运蛋白TolB作为疫苗候选抗原的可能性,根据已发表的全基因组序列,设计特异性引物PCR扩增tolB的基因全长序列。序列分析显示,该基因(GenBank登录号JQ846501)全长1353bp,共编码450个氨基酸残基。BLAST分析发现,溶藻弧菌tolB基因与其他已知弧菌的tolB具有较高的同源性,序列保守,可作为共同抗原候选蛋白。用原核表达的tolB蛋白免疫SPF级小鼠,制备多克隆抗体,ELISA效价达1∶40000。免疫印迹表明鼠抗tolB血清能与诱导后的重组蛋白发生特异反应。为进一步研究tolB对石斑鱼(Epinephelusawoara)的免疫保护性,用TolB蛋白两次免疫石斑鱼,ELISA检测发现,免疫石斑鱼血清的抗体效价在第4周达到峰值(1∶2048)。攻毒实验结果表明TolB对石斑鱼的免疫保护率为76%。结果表明,溶藻弧菌转运蛋白TolB具有较好的免疫原性和免疫保护性,可作为弧菌亚单位疫苗的候选抗原。 %K 溶藻弧菌 %K tolB基因 %K 免疫原性 %K 免疫保护 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10741.shtml