%0 Journal Article %T 拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件的优化 %A 彭银辉 %A 蔡小辉 %A 熊向英 %A 刘旭佳 %A 黄国强 %J 生物技术通报 %P 138-142 %D 2015 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.020 %X 旨在优化拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件。克隆拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因成熟肽片段,与pET-28a表达载体连接后,转入到大肠杆菌BL21(DE3)中,通过优化条件进行诱导表达。结果显示,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.2mmol/L、37℃条件下培养4h后表达量最大,分子大小与预期值相符。融合蛋白主要以包涵体形式高效表达,通过HisTrapHP柱子使其得到进一步纯化。Westernblot分析表明,该融合蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合。说明通过优化表达条件,获得拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达表达产物。 %K 拟穴青蟹 %K hyastatin基因 %K 原核表达 %K 条件优化 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10740.shtml