%0 Journal Article %T 日本鳗鲡I型Cathelicidin基因的克隆与原核表达 %A 张东玲 %A 喻达辉 %J 生物技术通报 %P 124-131 %D 2015 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.018 %X Cathelicidin是目前发现的一个最大抗菌肽家族,具有多重生物学功能。旨在探索和利用鱼类Cathelicidin抗菌机制和潜在的生物学功能。应用RACE-PCR技术获得日本鳗鲡I型Cathelicidin(AjCathI)基因的cDNA全长序列。AjCathI的cDNA全长为842bp,开放阅读框为570bp,编码189个氨基酸。氨基酸序列分析表明,AjCathI靠近C端有4个保守的半胱氨酸序列,抗菌成熟肽与香鱼(Plecoglossusaltivelis)抗菌成熟肽相似性最高,同源性为65.57%。进化分析表明,AjCathI与其它鱼类亲缘关系较近,处于同一个分支上。将AjCathI基因克隆至pET-28a载体,转化EscherichiacoliBL21(DE3)宿主菌进行表达。结果表明,AjCathI以包涵体形式表达,经鎳柱纯化、Westernblot验证和透析复性,获得高纯度的重组蛋白。 %K 日本鳗鲡 %K Cathelicidin %K 抗菌肽 %K RACE-PCR %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10738.shtml