%0 Journal Article
%T 哈氏弧菌谷胱甘肽还原酶基因克隆及原核表达
%A 朱帆
%A 丁燏
%A 鲁义善
%A 简纪常
%A 吴灶和
%J 生物技术通报
%P 183-188
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.06.029
%X 经克隆哈氏弧菌谷胱甘肽还原酶(GR)基因，并构建其原核表达载体，以获得相应的表达蛋白。将GR和pET-32a(+)通过BamHI和XhoI双酶切后，体外用T4连接酶连接，构建重组质粒pET-GR；然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中，利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，应用SDS-PAGE分析表达情况和表达条件。SDS-PAGE电泳获得分子量约为68.9kD融合蛋白条带。在E.coliBL21(DE3)中重组质粒pET-GR的表达条件为28℃，0.7mmol/L的IPTG浓度诱导4h表达量最高，且主要以包涵体形式表达。哈氏弧菌谷胱甘肽还原酶基因在大肠杆菌中获得了高效表达。
%K 哈氏弧菌
%K 谷胱甘肽还原酶
%K 基因克隆
%K 原核表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10714.shtml