%0 Journal Article
%T 中华绒螯蟹性腺特异表达蛋白EsSOX21b-like的原核表达与抗体制备
%A 杨国翠
%A 崔峥
%A 邱高峰
%J 生物技术通报
%P 189-194
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.06.030
%X Sox(SRY-relatedHMG-box)基因编码一类重要的转录因子，其产物都具有一个HMG基序保守区。之前我们在中华绒螯蟹分离鉴定了一个只在性腺中特异表达转录本EsSox21b-like，为了验证EsSOX21b-like蛋白是否也在中华绒螯蟹性腺中特异表达，本研究原核表达了EsSOX21b-like蛋白，即将EsSox21b-like基因序列克隆到pGEX-2T表达载体，构建重组表达质粒pGEX-2T-EsSox21b-like，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导融合表达，经SDS-PAGE分析表明，融合蛋白主要以包涵体形式存在，分子量约为54kD。利用Ni柱亲和纯化融合蛋白后免疫家兔，制备了多克隆抗体，Westernblotting检测表明该抗体能特异地识别性腺组织中EsSOX21b-like蛋白，而在其他组织未检测到其表达，目的蛋白分子量约为28kD，在精巢组织中的表达量比在卵巢中高，该结果暗示EsSOX21b-like可能在性腺发育过程中起重要调控作用。
%K 中华绒螯蟹
%K EsSOX21b-like蛋白
%K 原核表达
%K 抗体制备
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10715.shtml