%0 Journal Article
%T 高粱SbGABA-Ts基因的克隆、原核表达及纯化
%A 杨泽伟
%A 王龙海
%A 朱莉
%A 汪海
%A 黄大昉
%A 郎志宏
%J 生物技术通报
%P 93-99
%D 2015
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.05.015
%X 植物中GABA（γ-氨基丁酸）代谢与植物生长发育、信号传递及逆境响应等过程密切相关，而参与GABA代谢的关键酶GABA-T（γ-氨基丁酸转氨酶）在重要农艺作物中的研究相对滞后。利用同源性分析在高粱基因组数据库中获得两个γ-氨基丁酸转氨酶（SbGABA-T）基因，RT-PCR方法进行基因克隆，并连入原核表达载体pET28a（+），转化E.coliBL21（DE3）进行基因异源表达分析。结果表明，包含SbGABA-T编码区全长的融合蛋白主要在包涵体中表达，而去除了SbGABA-TN端信号肽的融合蛋白以部分可溶的形式存在。进一步优化表达条件，IPTG浓度为1mmol/L时，16℃低温诱导18h，即可获得大量可溶性融合蛋白。用带His标签的镍柱对融合蛋白进行了纯化。
%K 高粱GABA-T
%K 原核表达
%K 纯化
%K 信号肽
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10665.shtml