%0 Journal Article
%T 携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定
%A 程莉
%A 袁成福
%A 黄秀凝
%A 卜友泉
%A 易发平
%A 刘革力
%A 汪长东
%A 宋方洲
%J 生物技术通报
%P 87-91
%D 2009
%X 建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响。将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPERRetro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株SiHa细胞,并用嘌呤霉素筛选产生稳定的细胞克隆,用实时荧光定量PCR和Westernblotting检测细胞中NFBD1mRNA和蛋白表达的变化。重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染SiHa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;实时荧光定量PCR和Westernblot-ting检测人NFBD1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。携带人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染SiHa细胞后能明显抑制NFBD1mRNA和蛋白表达,为进一步研究NFBD1在宫颈癌中的作用奠定了基础。
%K 逆转录病毒载体
%K shRNA
%K NFBD1基因
%K 宫颈癌
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5156.shtml