%0 Journal Article %T 土壤中脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及脂肪酶基因的克隆 %A 玄国营 %A 陈芳 %A 李予霞 %A 高剑峰 %J 生物技术通报 %P 139-143 %D 2009 %X 以橄榄油为惟一碳源进行富集培养、以罗丹明B为指示剂的平板进行初筛,摇瓶复筛得到产脂肪酶菌株;利用滴定法、平板扩散法以及转酯反应试验,最终筛选出具有较高转酯活性脂肪酶的菌株B2。通过对B2进行形态学观察,生理生化测定以及16SrDNA特征片段比较分析,初步确定B2为克雷伯氏菌属(Klebsiellasp.)。通过特定引物PCR扩增得到B2菌株两个脂肪酶基因K1和K2。利用丙酮法和(NH)2SO4沉降法得到B2菌株体内的胞内酶,以叔丁醇为溶剂,催化棉籽油与甲醇反应,经过薄层层析和高效液相检测产物为生物柴油。 %K 生物柴油 %K 克雷伯氏菌 %K 脂肪酶 %K 脂肪酶基因 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5108.shtml