%0 Journal Article
%T 一种用质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞的实用操作技巧
%A 陈洪栋
%A 董文博
%A 李红民
%J 生物技术通报
%P 297-299
%D 2009
%X 目的是建立一种简化、实用的用质粒DNA转化大肠杆菌的操作方法。采用氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞。以质粒pUC18,pCSN44,pAN52-1Not,pETts,pANth和植物双元表达载体pCAMBIA1301分别转化用于质粒扩增与保存的常用大肠杆菌菌株Top10和DH5α以及用于原核表达的常用大肠杆菌菌株BL21(DE3)和TB1。质粒与感受态细胞的混合液置冰上作用一定时间后,直接涂布含有筛选抗生素的LB平板,于37℃培养12～16h。结果表明,用不同大小的质粒DNA转化不同的大肠杆菌菌株,都可以获得满足实验要求,转化效率可高达103～4阳性克隆/μg。该方法较标准的转化流程更加简便、省时、实用。
%K Escherichiacoli
%K 转化方法
%K 质粒
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract4998.shtml