%0 Journal Article
%T 鼠OAZ1基因的真核表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达
%A 刘梦瑶
%A 韩钰
%A 蔡富强
%A 何玲
%A 王艳林
%J 生物技术通报
%P 173-176
%D 2010
%X 构建鼠OAZ1基因真核表达质粒,观察OAZ1-GFP融合蛋白在绿猴肾细胞COS7中的表达。利用RT-PCR的方法获得鼠OAZ1基因,再利用重叠延伸PCR缺失掉OAZ1序列中的205位碱基T,由此获得无需阅读框移码即可编码全长OAZ1的突变基因。将此突变基因克隆入真核表达载体pEGFP-N1获得重组质粒pEGFP-N1-OAZ1-T。将此质粒瞬时转染COS7后,采用RT-PCR,Westernblotting,免疫荧光技术观察检测目的基因的表达情况。结果显示,酶切和测序证明质粒pEG-FP-N1-OAZ1-T构建正确,转染COS7细胞后,OAZ1-GFP融合蛋白能在细胞中高效表达。成功构建了pEGFP-N1-OAZ1-T真核表达质粒,在COS7细胞内,该质粒能成功指导OAZ1-GFP融合蛋白合成。
%K OAZ
%K 多胺代谢
%K 融合蛋白
%K 真核表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5657.shtml