%0 Journal Article %T 四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系的正交优化 %A 杨路存 %A 陈桂琛 %A 周国英 %A 宋文珠 %A 李春丽 %A 许璟瑛 %J 生物技术通报 %P 123-128 %D 2010 %X 采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系中的4种主要因素(Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,PCR结果用统计软件SPSS16.0分析。结果显示,Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP这3因素的不同水平对PCR反应结果都有显着影响,其中Mg2+的浓度影响最大。筛选出各反应因素的最佳水平,建立四数獐牙菜ISSR-PCR反应的最佳体系(25μL)为3.0mmol/LMg2+,250μmol/LdNTP,0.6μmol/L引物,1UTaqDNA聚合酶,40ngDNA,2.5μL10×buffer。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行四数獐牙菜遗传多样性分析以及物种保护奠定了技术基础。 %K 四数獐牙菜 %K ISSR-PCR %K 正交设计 %K 体系优化 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5688.shtml