%0 Journal Article %T NtSKP1基因的反义载体构建及转基因烟草的产生 %A 张付云 %A 李伟 %A 张瑛 %A 孙秋颖 %A 李研 %A 杜昱光 %J 生物技术通报 %P 141-145 %D 2010 %X 根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473bp)片段。将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3443bp的目的片段,插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含NtSKP1基因片段反向序列的植物表达载体pART27-skp1a,其转录产物能减弱目的基因的表达。将pART27-skp1a质粒导人根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,经选择分化培养,获得转基因烟草。 %K NtSKP1基因 %K 反义表达载体的构建 %K 转基因烟草 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5348.shtml