%0 Journal Article
%T 枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达
%A 李海军
%A 王林刚
%A 王治泽
%A 陈芳
%A 高剑峰
%J 生物技术通报
%P 90-94
%D 2010
%X 借助生物信息学对已克隆的枯草杆菌脂肪酶LipB2全长基因序列进行比对分析。结果显示该脂肪酶基因全长635bp,编码包括31个氨基酸分泌型信号肽在内的211个氨基酸,与NCBIGenBank中已报道的枯草杆菌属脂肪酶核苷酸序列有94.0%的一致性。将该基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用枯草杆菌脂肪酶的信号肽序列进行了分泌表达。SDS-PAGE电泳显示分泌表达的脂肪酶分子质量约为21kD。对表达条件优化后,在30℃、大肠杆菌菌液OD600值为1.8、乳糖诱导浓度为1.5mM、摇瓶发酵10h后大肠杆菌分泌表达26.0U/mL重组脂肪酶,相比较IPTG的诱导,既实现了脂肪酶的高效表达,又节省了成本。
%K 乳糖诱导
%K IPTG诱导
%K 枯草杆菌
%K 脂肪酶基因
%K 分泌表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5387.shtml