%0 Journal Article %T 莱芜猪心脏cDNA文库的构建与鉴定 %A 李付美 %A 闫顺 %A 曲志才 %A 徐来祥 %J 生物技术通报 %P 139-142 %D 2010 %X 以莱芜猪心脏为供试材料,采用改进的异硫氰酸胍法提取心脏总RNA。通过SMART技术反转录合成全长cD-NA,经LD-PCR扩增后与pMD18-T载体连接并转化细菌DH5α,测定滴度和重组率,构建成莱芜猪心脏全长cDNA文库。经初步检测,原始文库的滴度为1.8×105CFU/mL,重组率约为94.4%。从原始文库随机挑取13个单菌落过夜培养,提取质粒,经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切,凝胶电泳显示插入片段大小在0.3-2.0kb之间。 %K 莱芜猪 %K 心脏 %K cDNA文库 %K SMART技术 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5436.shtml