%0 Journal Article
%T GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化
%A 张怡
%A 周庆峰
%A 贾孟
%A 张红绪
%A 李成伟
%J 生物技术通报
%P 155-159
%D 2011
%X 为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4。经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在不同浓度的IPTG和不同温度诱导下,经SDS-PAGE分析鉴定,表达出Mr约为30kD的目的蛋白,灰度扫描显示目的蛋白占菌体总蛋白的29.9%,超声裂解后的上清通过Sepharose4B亲和层析纯化、透析、除盐及冷冻干燥得到高纯度的目的蛋白。本研究成功制备了高纯度的GST-Exendin-4融合蛋白,为下一步进行目的蛋白大规模的生产打下了良好的基础。
%K Exendin-4
%K 融合蛋白
%K 可溶表达
%K 亲和纯化
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5840.shtml