%0 Journal Article
%T 柔嫩艾美耳球虫新基因的生物信息学分析与克隆表达
%A 姜连连
%A 林矫矫
%A 韩红玉
%A 董辉
%A 赵其平
%A 朱顺海
%A 马卫娇
%A 程军
%A 曾艳波
%A 黄兵
%J 生物技术通报
%P 108-113
%D 2011
%X 为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)的两个主要入侵发育阶段——子孢子和裂殖子的差异基因,根据已报道的子孢子与裂殖子差异的ESTs序列,应用RACE技术克隆获得了子孢子阶段差异表达的新基因全长cDNA序列,命名为ZL583。该基因全长为862bp,开放阅读框(ORF)为486bp,编码161个氨基酸,编码蛋白的分子量约为16.9kD,利用生物信息学分析软件,分析新基因所编码蛋白的性质、定位、结构等特征。利用荧光定量PCR对柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段该基因的表达量进行分析显示,子孢子阶段的表达高于其他发育阶段。将ZL583克隆于pET-28a中构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达,获得重组蛋白分子量约23kD。免疫印迹分析显示该重组蛋白可与兔抗子孢子血清发生特异性反应,表明该蛋白具有较好的反应原性。该结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定基础。
%K 柔嫩艾美耳球虫
%K 子孢子
%K 裂殖子
%K 克隆
%K 表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6015.shtml