%0 Journal Article
%T 适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定
%A 李俊毅
%A 李想
%A 褚庆华
%A 吕蓉
%A 张舒亚
%A 潘良文
%A 黄新
%A 朱水芳
%J 生物技术通报
%P 76-83
%D 2011
%X 针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,结果表明,标准分子pEASY-RT73高度特异于转基因油菜RT73品系。以标准分子为标准品的普通PCR扩增中,3个目标片段的检测下限(LOD)均为10拷贝。实时荧光PCR检测的LOD均为25拷贝,定量下限(LOQ)均为50拷贝。以标准分子为标准品构建的标准曲线反应效率介于0.96-1.02间,相关系数均大于0.999。分别以PEP和HMG为内标准基因对5个盲样的测试结果显示,测量值与设定值间偏差(Bias)介于-14.13%-14.29%间,SD小于0.20,RSD小于18.0%。因此,标准分子pEASY-RT73可很好地替代植物来源阳性标准品用于转基因油菜RT73及其来源产品品系特异性检测。
%K PCR
%K RT73
%K 标准分子
%K 品系特异性检测
%K 实时荧光PCR
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6045.shtml