%0 Journal Article
%T α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
%A 贾红红
%A 李玉
%A 刘逸寒
%A 王尧
%A 梁晓梅
%A 路福平
%J 生物技术通报
%P 185-190
%D 2011
%X 利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuct。将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,25℃,0.1mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达4h,并用SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。结果表明,可表达出相对分子质量为33kD的蛋白,与预期分子量一致,说明α1,2-岩藻糖基转移酶在大肠杆菌BL21中实现表达,应用HPLC法进行酶活检验,酶活达到了13.21pmol/(mgPr.h)。
%K α12-岩藻糖基转移酶
%K 基因克隆
%K 原核表达
%K 大肠杆菌
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6003.shtml