%0 Journal Article
%T 大鼠D-双功能蛋白基因原核表达载体的构建及表达
%A 贺文
%A 赵雪彦
%A 姚敏
%A 史海水
%A 许丽辉
%A 刘昆
%A 姜玲玲
%J 生物技术通报
%P 139-142
%D 2011
%X 利用原核表达系统构建大鼠D-双功能蛋白表达载体。设计基因拼接引物,通过RT-PCR合成DBP基因cDNA序列,将酶切、纯化的DBP基因与经相同处理的表达载体pET-28a相连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组子。将通过酶切及序列分析鉴定阳性的重组子质粒转入感受态大肠杆菌BL21-gold表达菌中,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况。结果显示,成功获得了包含DBP基因的双链cDNA序列,酶切、序列分析及Westernblotting证实成功构建了DBP基因的原核表达载体。通过原核表达系统,DBP蛋白以包涵体形式产生,复性后可获得高表达的目的蛋白。
%K D-双功能蛋白
%K 原核表达
%K 包涵体
%K 大鼠
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5933.shtml