%0 Journal Article
%T 光裸星虫ISSR-PCR反应体系的单因素优化试验
%A 彭银辉
%A 宋忠魁
%A 蔡小辉
%A 杨家林
%A 刘丽梅
%J 生物技术通报
%P 153-157
%D 2011
%X 以光裸星虫为试验材料,通过单因素方法对影响其ISSR-PCR扩增效果的因子(模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶、甲酰胺和二甲基亚砜)浓度进行研究。确立适合光裸星虫ISSR-PCR的反应体系:25μL体积含1×PCRbuff-er、模板DNA用量为10-50ng、TaqDNA聚合酶为0.75-1.75U、Mg2+浓度为1.5-2.5mmol/L、dNTP浓度为0.20mmol/L,引物浓度为0.8-1.2μmol/L,甲酰胺和二甲基亚砜的添加并不能优化光裸星虫ISSR-PCR反应结果。利用所建立的体系对广西北海群体的20个光裸星虫个体基因组DNA进行ISSR-PCR扫描,结果表明,优化后的体系均能扩增出清晰、多态性高的条带。
%K 光裸星虫
%K ISSR
%K 优化
%K 单因素
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract5964.shtml